Mastrini ukończył Konserwatorium F. Morlacchi w Perugii, doskonaląc grę pod okiem Maestro Vincenzo Vitale. W swojej karierze wykonywał zarówno repertuar wielkich mistrzów, takich jak: Chopin, Liszt, Brahms czy Beethoven, jak i własne kompozycje, które stały się znakiem rozpoznawczym jego twórczości. Jest autorem ponad 20 albumów wydanych na rynku międzynarodowym.
Przełomowy w jego karierze okazał się album Il Mio Mondo al Contrario, w którym odtwarza klasyczne i własne utwory od końca, zaczynając od ostatniej nuty. Ten niecodzienny koncept przyniósł mu światowe uznanie i status jednego z najbardziej fascynujących współczesnych pianistów poszukiwaczy.
W 2001 roku zdobył wpis do Księgi Rekordów Guinnessa, komponując najkrótszą operę na świecie — Il Bacio, trwającą 3 minuty i 20 sekund.